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        8. HPLC法測定脂溶性維生素分析方法

          發布于 2012/07/17閱讀(1462)來源 zxj標簽 HPLC

          摘要

          HPLC法測定脂溶性維生素分析方法:樣品中的維生素A 及維生素E 經皂化處理后,將其不可皂化部分提取至有機溶劑中。用高效液相色譜法C18反相柱將維生素A 和維生素E 分離,經紫外檢測器檢測,并用內標法定量測定。

          內容

          HPLC法測定脂溶性維生素分析方法

          高效液相色譜分析
          1.色譜條件(推薦條件)
          預柱:hypersil ODS 5μm,4mm×10cm;
          分析柱:hypersil ODS 5μm,4.6mm×25cm ;
          流動相:甲醇:水=98:2;混勻,于臨用前脫氣;
          紫外鹼測器波長:300nm;量程0.02;
          進樣量:20μL 進樣定量環;
          流速: 1.65~1.70mL/min
          2.樣品分析
          取樣品濃縮液20μL,待繪制出色譜圖及色譜參數后,再進行定性和定量。
          定性:用標準物色譜峰的保留時間定性。
          定量:根據色譜圖求出某種維生素峰面積與內標物峰面積的比值,以此值在標準曲線上查到其含量?;蛴没貧w方程求出其含量。
          3,計算
          X=C/m×V×100/1000
          X—某種維生素的含量(mg/100g);
          C—由標準曲線上查到某種維生素含量(μg/mL);
          V—樣品濃縮定容體積(mL);
          m:樣品質量(g)。
          用微處理機二點內標法進行計算時.按其計算公式計算或由微機直接給出結果。結果的允許測定結果相對偏差絕對值≤10%

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